雞冠狀病毒滅活檢測

雞傳染性支氣管炎是雞的唯一的一種冠狀病毒病，是由冠狀病毒科冠狀病毒屬雞傳染性支氣管炎病毒（IBV）引起的，該病對養(yǎng)雞業(yè)危害較大，應高度重視其防治工作。流行特點是病雞為主要傳染源，病毒在病雞糞便中可存活12～56天。病雞的糞便、口鼻分泌物、呼出的氣體，被污染的空氣、用具、飼料和飲水，會通過呼吸道、消化道傳染給易感雞。一年四季均可發(fā)生，以冬季發(fā)病較多。咨詢電話: 13816144967 (微信同號)

雞冠狀病毒滅活檢測方案：

A、實驗資料：SPF雞胚，并自行孵化至10日齡。雞傳染性支氣管炎病毒采用 IBV QXL87株種毒。實驗所用稀釋液：生理鹽水（0.9% NaCl）高壓滅菌，并保管于4℃冰箱。

B、實驗對象：1號保管液（滅活保管液）、2號保管液（非滅活型病毒保管液）。

C、實驗內(nèi)容：分為兩局部

不同病毒保管液滅活效果的雞胚感染比擬

將制備好的雞傳染性支氣管炎病毒 QXL87株種毒添加至保管液中，按1（病毒原液）:10（保管液） 比例，置室溫18-26℃滅活45min；將滅活好的病毒液接種SPF雞胚停止滅活檢驗，同時對收獲尿囊液停止雞傳染性支氣管炎病毒核酸檢測，參照GB/T 23197-2008 雞傳染性支氣管炎診斷技術(shù)，運用RNA提取試劑盒提取RNA，并運用禽源冠狀病毒核酸檢測試劑盒(PCR熒光探針法)檢測。

雞冠狀病毒滅活檢測結(jié)果：

選擇適宜的病毒保管液對病毒停止滅活，按獸藥典請求停止滅活檢驗。將滅活好樣品按尿囊腔接種方式接種10日齡SPF雞胚，每個樣品接種10枚雞胚，0.1 mL/枚，置于37℃培育箱中培育144 h，棄去24 h死亡的雞胚，察看記載24-144 h雞胚死亡狀況和接種后有病變的活胚數(shù)的數(shù)量。察看雞胚病變，同時收獲尿囊液停止PCR檢測，即為第一代接種核酸檢測結(jié)果。然后將第一次收獲的四個尿囊液停止二次雞胚接種，培育144h后收獲尿囊液停止PCR檢測，即為第二代接種核酸檢測結(jié)果。咨詢電話: 13816144967 (微信同號)