白色念珠菌基因編輯

白色念珠菌（Monilia albican），是一種真菌，通常存在于正常人口腔，上呼吸道，腸道及陰道，它屬于導(dǎo)致人類高死亡率的四大病原真菌之一，是世界上第二常見的機(jī)會(huì)性真菌感染因子。白色念珠菌是人體腸道微生物群(共棲真菌)的一部分，但它也引起健康個(gè)體的粘膜感染和免疫防御能力減弱的個(gè)體(免疫功能低下的個(gè)體和接受器官移植、接受嚴(yán)重手術(shù)或遭受嚴(yán)重創(chuàng)傷的患者)的嚴(yán)重機(jī)會(huì)性感染。咨詢電話:13816144967(微信同號(hào))

傳統(tǒng)λRed同源重組法

白色念珠菌基因敲除的傳統(tǒng)方法是利用其自身的Rec A同源重組系統(tǒng)編碼的RecA和RecBCD蛋白介導(dǎo)DNA的同源重組。但是以該系統(tǒng)為基礎(chǔ)的基因打靶存在較多的缺點(diǎn)：首先，由于RecBCD具有核酸外切酶活性，線性的打靶DNA將被降解，打靶基因必須整合于戴體上才能進(jìn)行同源重組；其次，打靶片段需要較長(zhǎng)的同源臂，往往長(zhǎng)達(dá)幾百個(gè)堿基，而且同源重組效率低，往往不能得到所需的重組子。

CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)：

CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)就是通過人工設(shè)計(jì)的 sgRNA（guide RNA）來識(shí)別目的基因組序列，并引導(dǎo) Cas9 蛋白酶進(jìn)行有效切割 DNA 雙鏈，形成雙鏈斷裂，損傷后修復(fù)會(huì)造成基因敲除或敲入等，最終達(dá)到對(duì)基因組DNA 進(jìn)行修飾的目的。相較于傳統(tǒng)的同源重組敲除基因的方法，CRISPR-Cas9基因編輯技術(shù)速度更快，無(wú)痕，結(jié)果更準(zhǔn)確，非常便于您開展后續(xù)的實(shí)驗(yàn)研究。

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