甲型流感病毒H1N1滅活檢測

流感病毒分為甲、乙、丙、丁4型，人流感主要是甲型流感病毒和乙型流感病毒引起。甲流全名為甲型H1N1流感，是由甲型H1N1流感病毒引起的一種急性呼吸道傳染病。人群對甲型H1N1流感病毒普遍易感，并可以人傳染人。甲型流感每年呈季節(jié)性流行，易引起大流行。咨詢電話:13816144967(微信同號)

臨床標本的采集

采集對象:所有甲型流感( H1N1)疑似病例應該采集上呼吸道標本來檢測豬進行H1N1病毒的相關檢測

采集種類:鼻咽拭子/吸取物或者鼻腔沖洗液/吸取物。如果不能收集這些標本，可合并鼻拭子與口咽拭子。氣管插管的病人也應收集氣管吸取物。標本應置于無菌病毒運輸液(VTM)，并立即用冰塊或冰排保存或置于4 °C (冰箱)，并馬上運送至實驗室

采集器材要求

拭子:應使用頭部為合成纖維的拭子(例如，聚酯纖維)，用鋁或塑料做桿。不推薦棉拭子和木桿。不能用海藻酸鈣做的拭子收集標本。標本采集管應包含3毫升病毒運輸液

采樣管:外螺旋口、耐一70°C凍存;

采樣液:含有蛋白質(zhì)穩(wěn)定劑， 阻止細菌和真菌生長的抗生素，緩沖液(可使用Hank's或Eagle's等培養(yǎng)液加入抗菌素和0.5%BSA)

標準的儲存和運輸

臨床標本儲存

所有呼吸道標本應保存在4°C，并盡快放置在-70°C。如果沒有-70°C度冰箱，標本應保存在4°C，但不應超過4天

臨床標本運輸

應按照A類包裝 要求進行樣品的包裝，所有標本應標示清楚。疑似病例標本運送應包含的信息請參照禽流感標本運輸咨詢電話:13816144967(微信同號)

檢測方法

1、首選Real-time RT-PCR方法檢測

2、快速流感抗原檢測

3、免疫熒光法

4、病毒分離

? 甲型流感病毒的快速抗原檢測可以用于檢測該豬流感病毒，但由于和其它檢測方法相比靈敏度較低，因此可能會導致假陰性結(jié)果。

? 由于免疫熒光和其他免疫檢測方法中使用的抗體可能不會和該病毒的靶位點結(jié)合，因此會產(chǎn)生假陰性結(jié)果。

? 雖然在PCR方法中檢測流感基因的高度保守片段和確診A型流感的引物也許還可以使用，但目前PCR診斷試驗中用于甲型流感病毒分型的引物可能不能檢測非人類病毒。

? 確診豬流感病毒A/H1N1的唯一可靠的方法是進行病毒分離(病毒分離應在BSL-3實驗室進行)，并且至少進行部分基因測序。但陰性結(jié)果不能排除豬源流感病毒( A/H1N1)感染

1、流感快診檢測

區(qū)別甲、乙型流感病毒，乙型陽性排除，全部陰性結(jié)果不能排除

2、RT-PCR檢測

針對豬源甲型流感病毒的特異性引物，人源甲型流感病毒弓|物不能有效地診斷豬源病毒感染

3、病毒分離

使用MDCK細胞、雞胚可有效分離豬源病毒，對目前不能鑒定的甲型流感病毒株必須上送鑒定，在進行基因測序后可確定豬源病毒感染咨詢電話:13816144967(微信同號)

檢測實驗室生物安全防護要求

生物安全防護原則

標本的檢測、儲存、包裝和運送應按照《病原微生物室生物安全管理條例》( 國務院424號令)和《可感染人類的高致病性病原微生物菌(毒)種或樣本運輸管理規(guī)定》(中華人民共和國衛(wèi)生部第45號令)等有關規(guī)定執(zhí)行

采集疑似感染A(H1N1)型豬流感病毒的患者臨床標本、進行標本處理、包裝、診斷性檢測及進行病毒分離的工作人員必須進行嚴格的安全防護

所有的涉及病例標本的實驗操作(包括樣本的處理、包裝及包裝拆除)必須在生物安全柜內(nèi)進行;臨床標本的實驗活動(病毒分離除外)必須在BSL-2實驗室內(nèi)進行病毒分離、鑒定必須在BSL-3或更高一級的實驗室內(nèi)進行

實驗室廢棄物處理原則

應遵循所在機構(gòu)標準實驗室操作規(guī)程內(nèi)的所有廢棄物處置程序進行121 °C、 30分鐘高壓滅菌處理(注意:外排式高壓滅菌器存在生物安全隱患)

化學消毒劑浸泡

有效的實驗室使用的化學消毒劑

70%酒精

5%來蘇爾

10%漂白液

所有人員在工作期間均應進行自我癥狀監(jiān)測，一旦出現(xiàn)包括發(fā)熱、咳嗽、喉嚨痛、嘔吐、腹瀉、頭痛、流鼻涕和肌肉疼痛癥狀，應立即報告。

如有人員在無防護情況下暴露于采集自A (H1N1)型豬流感確診病例的臨床物質(zhì)或活病毒，應考慮在暴露后的7天時間里進行抗病毒化學藥物預防。咨詢電話:13816144967(微信同號)